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在密閉的蒸鍋內,其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,使水的沸點不斷提高,從而鍋內溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下,鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。

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高壓蒸汽滅菌的操作方法

(1)在外層鍋內時時彩軟件加適量的水,將需要滅菌的物品放入內層鍋,蓋好鍋蓋并對稱地扭緊螺旋。

(2)加熱使鍋內產生蒸氣,當壓力表指針達到 33.78kPa時,打開排氣閥,將冷空氣排出,此時壓力表指針下降,當指針下降至零時,即將排氣閥關好。

(3)繼續加熱,鍋內蒸氣增加,壓力表指針又上升,當鍋內壓力增加到所需壓力時,將火力減小,按所滅菌物品的特點,使蒸氣壓力維持所需壓力一定時間,然后將滅菌器斷電或斷火,讓其自然冷后再慢慢打開排氣閥以排除余氣,然后才能開蓋取物。


高壓蒸汽滅菌的關鍵

完全排除鍋內空氣,使鍋內全部是水蒸氣,滅菌才能徹底。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法,但目的都是要排凈空氣,使鍋內均勻升溫,保證滅菌徹底。

排凈鍋內空氣的常用方法

關閉放氣閥,通電后,待壓力上升到0.05MPa時,打開放氣閥,放出空氣,待壓力表指針歸零后,再關閉放氣閥。關閥再通電后,壓力表上升達到0.1MPa時,開始計時,維持壓力0.1~0.15MPa 20分鐘。


降壓到一定程度后可緩慢放氣 / 壓力平衡后開蓋

到達保壓時間后,即可切斷電源,在壓力降到0.5MPa,可緩慢放出蒸氣,應注意不要使壓力降低太快,以致引起激烈的減壓沸騰,使容器中的液體四溢。當壓力降到零后,才能開蓋,取出培養基,擺在平臺上,以待冷凝。不可久不放氣,引起培養基成分變化,以至培養基無法擺斜面。一旦放置過久,由于鍋爐內有負壓,蓋子打不開,只要將放氣閥打開,大氣壓入,內外壓力平衡,蓋子便易打開了。


關于高壓蒸汽滅菌的滅菌時間和滅菌壓力

對高壓滅菌后不變質的物品,如無菌水、栽培介質、接種用具,可以延長滅菌時間或提高壓力。而培養基要嚴格遵守保壓時間,既要保壓徹底,又要防止培養基中的成分變質或效力降低,不能隨意延長時間。


高壓蒸汽滅菌的注意事項:

(1)待滅菌的物品放置不宜過緊。

(2)必須將冷空氣充分排除干凈,否則鍋內溫度達不到規定溫度,影響滅菌效果

(3)滅菌完畢后,不可立即放氣減壓,否則瓶內液體會劇烈沸騰,沖掉瓶塞而外溢甚至導致容器爆裂。須待滅菌器內壓力降至與大氣壓相等后才可開蓋。

(4)裝培養基的試管或瓶子的棉塞上,應包油紙或牛皮紙,以防冷凝水入內。

(5)為了確保滅菌效果,應定期檢查滅菌效果。

       常用的方法是將硫磺粉末(熔點為115℃)或安息香酸(熔點為120℃)置于試管內,然后進行滅菌試驗。如上述物質熔化,則說明高壓蒸氣滅菌器內的溫度已達要求,滅菌的效果是可靠的。也可將檢測滅菌器效果的變色膠紙(其上有溫度敏感指示劑)貼于待滅菌的物品外包裝上,如膠紙上指示劑變色,亦說明滅菌效果是可靠的。

(6)現在已有微電腦自動控制的高壓蒸氣滅菌器,只需放去冷氣后,儀器即可自動恒壓定時,時間一到則自動切斷電源并鳴笛,使用起來很方便。

 ( 7 ) 先滅菌再清洗原則:對于任何高壓滅菌后會重復使用的污染(有潛在感染性)器材不應當事先清洗,必須在高壓滅菌或消毒后再進行清洗、修復。


高壓蒸汽滅菌的對象/應用

高壓蒸汽滅菌是最常用的滅菌方法,一般以 101.33kPa處理15~20min,可達到對物品進行滅菌的目的。凡耐高溫和潮濕的物品,如常用培養基、生理鹽水、衣服、紗布、玻璃器材等都可用本法滅菌。

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